消化说念是一个东说念主体与外界能量交换的复杂系统，肠说念菌群在消化说念内对物资的消化继承阐明着进击作用，更会影响免疫、能量代谢以及东说念主体健康的诸多方面，菌群失和洽各种性裁汰与多种疾病关系[1]，肠说念菌群近十年景为了宇宙性的磋商热门。在正常情况下，肠说念菌群的组成是动态均衡的，互相制约、共存共荣【MADV-159】濡れ濡れびっちょまん 32010-07-23クリスタル映像&$MANIAC（クリス124分钟，但淌若肠说念菌群失调，就会增多疾病易理性，碎裂肠说念菌群的均衡，会对宿主的健康产生不良影响[2-3]。
SM调教东说念主体肠说念菌群是一个复杂的微生态系统，肠说念内的细菌可约莫包摄于10个门，其中硬壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、变形菌门(Proteobacteria，肠杆菌为主)、放线菌门(Actinobacteria)和疣微菌门(Verrucomicrobia)占主要上风，其余5个门的细菌数量较少[4]。乳酸菌(Lactic acid bacteria，LAB)和双歧杆菌(Bifidobacterium)是肠说念内的有益微生物，具有改善胃肠说念环境和真贵肠说念菌群均衡的作用，二者的菌群品貌和数量在一定进度上响应了肠说念的健康情景[5]。磋商标明不同东说念主群肠说念菌群群落结构存在极大相反，Yatsunenko等[6]分析了好意思国公民、马拉维东说念主和委内瑞拉好意思洲印第安东说念主3个不同东说念主群的肠说念微生物群落，发现2个非西方东说念主群的肠说念菌群结构在很猛进度上不同于西方东说念主群。2014年，本实验室磋商团队秉承焦磷酸测序技艺分析了中国9个省的汉族、藏族、壮族、哈萨克族、维吾尔族、白族和蒙古族一共7个民族314份健康志愿者粪便的微生物组成[7]，磋商恶果标明不同民族、不同糊口现象下并吞民族的东说念主群均含有其独到的肠说念菌群，缺憾的是受那时测序条款适度，分析恶果只到属水平。
单分子及时测序(Single molecule real time sequencing，SMRT)技艺是2013年好意思国太平洋生物技艺公司(Pacific Biosciences，PacBio)推出的新式DNA测序技艺，其超长的读长不错使磋商者准确得回样本中微生物的种水平组成，且无需模板扩增，脱手时间短，具有较高通量，约略准确响应难培养的或是已灭活微生物的情况。PacBio SMRT测序技艺已应用在传统发酵食物微生物各种性分析和东说念主体肠说念菌群结构分析等意见。Yang等诈欺此步伐分析了重庆萝卜泡菜老盐水中细菌的各种性和群落结构[8]；Kumari等诈欺PacBio SMRT测序技艺检测了东说念主体肠说念中潜在的益生乳杆菌菌种[9]。
本实验室团队针对复杂肠说念菌群生物样本，瞎想了乳酸菌16S rRNA基因特异性扩增引物L5[10]，L5可用于高通量测序，在种水平上毁坏乳酸菌并进行分类，有助于分析复杂样本中乳酸菌各种性问题。本磋商同期瞎想了双歧杆菌的特异性引物，在此基础上以27名来自中国内蒙古和蒙古国的健康蒙古族志愿者为磋商对象，秉承乳酸菌和双歧杆菌特异性引物扩增与PacBio SMRT测序技艺相贯串的步伐，初度在种的水平明白了健康蒙古族东说念主肠说念微生物组中乳酸菌和双歧杆菌的群落结构及生物各种性，构建肠说念中二者的特征数据库，基于此肠说念菌群特征大数据成心于完毕益生菌/元及膳食纤维等烦嚣步伐靶向调整肠说念菌群，可对特定病症起到调治改善作用，以赞助完毕精确医疗。
1 材料与步伐 1.1 材料和试剂 1.1.1 实验志愿者信息及样品网罗磋商共网罗了27名健康蒙古族志愿者的有用样品，包括14名来自中国内蒙古和13名现在是内蒙古农业大学留学生的蒙古国志愿者，志愿者信息详见表 1。所有这个词志愿者在提供样品时均莫得内分泌失调、糖尿病或其他任何的胃肠说念疾病，且在实验前的6个月内莫得服用过抗生素类药物。磋商得到了内蒙古农业大学的批准，所有这个词志愿者签署了知情本心书。
1.1.2 主要试剂和仪器Taq DNA团员酶、dNTP mix、10×Easy Taq buffer等PCR体系试剂，大连宝生物工程有限公司；MO BIO Power Fecal® DNA Isolation Kit，Mo Bio公司；5×TBE缓冲液(Na2EDTA·2H2O 3.72 g、Tris碱54.0 g、硼酸27.5 g，定容至1 L，pH 8.0)，天津基准化学试剂公司；测序试剂(DNA/Polymerase Bingding Kit P6 v2)、SMRT建库试剂盒(Pacific Biosciences SMRT bell TM Template Prep Kit 1.0)，太平洋生物科学公司。
测序平台，Pacific Biosciences公司；PCR仪，Applied Biosystems公司；微量紫外分光光度计，赛默飞科技公司；UPV凝胶成像分析系统，上海赛智创业科学公司；高速冷冻离心计，Eppendorf公司；核酸卵白定量仪，Invitrogen公司。
1.2 步伐 1.2.1 样品蚁合所有这个词志愿者均掌捏统一样品蚁合步伐，样品蚁合使命由志愿者个东说念主完成。使用实验室提供的无酶无菌管，蚁合约15 g崭新粪便样品后立即加入15 mL保护液，编号后立即放入液氮罐冷冻并尽快运回实验室存放于−80 ℃雪柜，以备后续实验操作。
1.2.2 样品细菌宏基因组DNA索要样品充分混匀后取0.3 g，秉承Power Fecal® DNA Isolation Kit抽提样品中细菌宏基因组DNA，操作按照阐明书要求智商进行。得回的DNA样品需要通过1.0%琼脂糖凝胶电泳和微量紫外分光光度计查考其无缺度、纯度以及浓度，DNA样品存于−80 ℃雪柜备用。
1.2.3 乳酸菌和双歧杆菌的基因组目的片断扩增、建库及测序乳酸菌16S rRNA基因特异性扩增正向引物：5′-GCTCAGGAYGAACGCYGG-3′；反向引物：5′-CACCGCTACACATGRADTTC-3′[10]。双歧杆菌特异性扩增正向引物：5′-GGTAAGAGTCGGACG CTGTGCAATAA-3′；反向引物：5′-GAAAGAAGA AGGCCACCAAGTAA-3′。所有这个词引物两头各加一段包含16个碱基的识别标签(Barcode)，用于区分并吞文库中的不不异品。以索要的细菌宏基因组DNA看成模板，用上述引物进行目的片断扩增，每个样品均对应独到的标签引物。PCR反应体系：KAPA HiFi HotStart Ready Mix 25 μL，正、反向引物(10 µmol/L)各1.2 µL，模板DNA 1.5 µL，ddH2O 21.1 µL。PCR反应条款：95 ℃ 1 min 30 s；95 ℃ 30 s，60 ℃ 40 s，72 ℃ 1 min，28次轮回；72 ℃ 7 min，4 ℃赶走。
扩增反应在Applied Biosystems PCR仪中进行，PCR反应家具用2%琼脂糖凝胶电泳检测及格后暂存于−20 ℃雪柜中备用。各样品的PCR家具经纯化后等质料夹杂，用Pacific Biosciences SMRT bell TM Template Prep Kit 1.0构建文库，严格凭证试剂盒阐明书智商实验。构建好的文库加测序引物和团员酶后使用PacBio RS Ⅱ仪器上机测序。
1.2.4 高质料序列的索要使用SMRT® Analysis Server v2.3.0中的RS_ReadsOfinsert.1过程对原始序列进行质控，乳酸菌的质控条款为：(1)插入片断重叠测序的次数≥5；(2)最短插入序列长度为650 bp；(3)最长序列长度为850 bp；(4)最小展望精确度为90%。双歧杆菌质控条款受扩增片断长度的影响，因此将最小插入片断长度和最大插入片断长度分别建树为600 bp和800 bp，其他质控条款同上。相宜以上尺度的序列界说为高质料序列，纳入下一步的生物信息学分析。
凭证象征的Barcode将原始序列分裂到每个样品中，然后去掉Barcode和引物序列，使用QIIME平台(v1.70)对高质料的序列进行生物信息学分析。
乳酸菌分析主要智商：
(1) PyNAST校准并将序列排都，在100%相似性下进行Uclust归并，开采无重叠的16S rRNA基因全长序列集，随后按照序列相似性分裂操作分类单位(Operational taxonomic unit，OTU)。
(2) 应用usearch (v6.1)[11]检测属于嵌合体序列的OTU序列，并在QIIME平台下去除。
(3) 对各OTU代表性序列分别使用Greengenes (v13.8)、RDP (v11.5)和Silva (v128)数据库进行比对，使用里面剧本整合3个数据的谨慎恶果并最终笃定各OTU的谨慎恶果。基于OTU table辩论各样品菌群在属和种水平的组成。
(4) 使用FastTree (v2.1.3)[12]软件辩论基于OTU代表性序列的进化树。
(5) 抽平各样本测序序列数并贯串智商(4)生成的进化树进行基于加权(Weighted)和非加权(Unweighted) UniFrac距离的主坐标分析。
(6) 以所有这个词样品中测序量最低的样品测序量为基准，辩论各样本香农指数(Shannon-Wiener index)、辛普森指数(Simpson index)、Chao1指数和发现的物种数量指数(Observed species)，用于评估各样本α各种性。
双歧杆菌与乳酸菌数据贬责智商主要相反为序列比对数据库不同。双歧杆菌扩增的目的片断为rpsK基因，秉承的数据库为从各双歧杆菌菌种基因组索要目的片断构建得到，其他智商与乳酸菌数据贬责过程交流。
1.2.5 数据贬责分别秉承Wilcoxon秩和查考、Kruskal-Wallis多组查考比拟两组和多组样品间α各种性相反。秉承LefSe (Linear discriminant analysis effect size)分析比拟不同分组间的相反菌群。使用主坐标分析(principal coordinate analysis，PCoA)这一非不断性的排序步伐对样分内散作念无偏见的不雅察。基于R讲话“vegan”包中的Anosim函数进行多元方差分析(Permutational multivariate analysis of variance，Permanova)，辩论不同分组对志愿者目的菌群影响的大小。使用“psych”包中的“corr.test”函数进行不同菌属和菌种间的spearman关系性分析，并使用“gplots”包以热图的神色展现关系性恶果。使用“ggplot2”包对QIIME分析得到的原始数据进行可视化贬责。
1.2.6 核酸序列登美艳实验所得回的测序数据均已上传到MG-RAST数据库()，登录号：mgp89183。
2 恶果与分析东说念主体肠说念菌群被觉得是东说念主体的又一进击“器官”，受到遗传基因、年岁、饮食民俗、疾病发生、糊口环境、地域等诸多因素影响，同期肠说念菌群也会对宿主的代谢、养分继承、免疫功能以及神经功能调整产生作用[1]。本磋商所搜集的27名健康蒙古族志愿者中包括14名来自中国内蒙古和13名来自蒙古国的留学生志愿者。志愿者年岁在20–32岁之间，平均年岁24.7岁。在提供样品时均莫得内分泌失和洽代谢性疾病或其他任何的胃肠说念疾病，均为健康的后生东说念主，在实验前的6个月内莫得摄入过抗生素类药物，扼杀抗生素对肠说念菌群的干扰。14名中国志愿者来自内蒙古自治区锡林郭勒盟(6东说念主)、兴安盟(4东说念主)、鄂尔多斯市(2东说念主)和呼伦贝尔市(2东说念主)，糊口在牧区或半农半牧区。通过对志愿者的问卷探望深化，日常饮食以乳品和肉食(羊肉、牛肉、骆驼肉)为主，搭配极少米面和蔬菜生果，其中肥美(BMI > 25)占比28.6% (4/14)，男女比例为1:1。13名留学生志愿者中11位来自蒙古国乌兰巴托市，2位来自中央省，天然糊口在市区，但日常仍所以乳、肉食物为主，保留着传统的饮食模式，以羊肉为主，米面食物和青菜食用相对内蒙古的志愿者要少，其中肥美(BMI > 25)占比38.5% (5/13)，男女比例为4:9。总体来说，志愿者为健康后生东说念主，年岁分散上莫得光显差距；内蒙古志愿者的东说念主群地域分散较广，蒙古国志愿者相对较集合；蒙古国留学生志愿者的肥美比例高于内蒙古志愿者，但二者之间莫得权贵相反(Χ2=0.30，P > 0.05)。
2.1 乳酸菌组成与相反分析 2.1.1 志愿者肠说念中乳酸菌组成应用三代测序技艺测序后，一齐样品共得回原始下机数据量98 036条，经QIIME贬责后发现其中共有20 420条序列属于乳酸菌，占比为20.83%。通过里面剧本索要这部分序列用于后续各样品乳酸菌各种性分析。
27名志愿者的肠说念菌群样品中乳酸菌在属水和缓种水平的组成情况如图 1所示，不错看出不同个体肠说念菌群中乳酸菌的组成及相对含量存在较大相反。从举座来看，在门水平上，所有这个词志愿者肠说念微生物中毁坏到的乳酸菌均属于硬壁菌门(Firmicutes)。在属的水平上，共毁坏到9个乳酸菌属，平均相对含量在1%以上的菌属共有4个，包括链球菌属(Streptococcus，63.44%)、乳杆菌属(Lactobacillus，30.49%)、瘤胃球菌属(Ruminococcus，2.80%)和魏斯氏菌属(Weissella，2.11%)。此外本磋商还毁坏到了部分相对含量在1%以下的乳酸菌菌属，包括肠球菌属(0.63%)、毛螺菌属(Lachnospira，0.36%)、葡萄球菌属(Staphylococcus，0.10%)、肉食杆菌属(Carnobacterium，0.03%)和光冈菌属(Mitsuokella，0.01%)，具体恶果如图 1A所示。
在种的水平上，本磋商在所有这个词志愿者样品中共发现68个乳酸菌种，分散情况如图 1B所示，平均每名志愿者肠说念乳酸菌菌种的数量为16个。所有这个词样品中，平均相对含量在1%以上的乳酸菌种共有8个，主要包括唾液链球菌(Streptococcus salivarius，36.41%)、瘤胃乳酸杆菌(Lactobacillus ruminis，17.94%)、德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii，3.11%)、罗氏乳杆菌(Lactobacillus rogosae，2.23%)、轻型链球菌(Streptococcus mitis，2.18%)、阴说念乳杆菌(Lactobacillus vaginalis，2.02%)、魏斯氏乳杆菌(Weissella confusa，1.54%)和鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus，1.09%)。
2.1.2 性别、BMI值和地域对志愿者肠说念菌群的影响参考文件[13]将27名志愿者凭证BMI值分为肥美组(BMI > 25)和正常组(18.5 < BMI≤24.9)，性别、BMI值和地域对志愿者肠说念中乳酸菌组成的影响如图 2所示。由图 2不错看出，男性志愿者乳酸菌菌群中链球菌属平均含量高于女性志愿者，女性肠说念菌群中乳杆菌属和魏斯氏菌属平均相对含量高于男性；肥美组较正常组而言乳杆菌属和魏斯氏菌属略有增多；来自我国内蒙古自治区的志愿者肠说念菌群中乳杆菌属低于蒙古国志愿者的，而链球菌属、瘤胃球菌属和魏斯氏菌属平均相对含量较高。在种水平上，肥美组和正常组莫得权贵相反(P > 0.05)；男性志愿者肠说念中唾液链球菌含量权贵高于女性(P < 0.05，图 3)，而在女性志愿者中瘤胃乳酸杆菌和阴说念乳杆菌较丰富，后者在男性中险些不存在。此外，本磋商基于Chao1指数和发现的物种数量指数统计发现：来自我国内蒙古自治区的志愿者肠说念菌群中乳酸菌菌种较丰富，其鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、罗氏乳杆菌(Lactobacillus rogosae)、魏斯氏乳杆菌(Weissella confusa)和扭链瘤胃球菌(Ruminococcus torques)相对含量权贵高于蒙古国志愿者(P < 0.05，图 3)。
2.1.3 志愿者肠说念乳酸菌群落结构影响因素比拟分析为了进一步探究性别、BMI值和地域对菌群结构的影响，进行了基于Bray-Curtis距离的主坐标分析，用于直不雅展现不同分组个体肠说念乳酸菌菌群组成的相反，进一步通过多元方差分析辩论了各分组是否会对志愿者肠说念乳酸菌菌群结构形成权贵影响。由图 4可知，性别、BMI值和地域均未对肠说念菌群结构形成权贵性影响(P > 0.05)，但基于性别的分组P值较接近0.05，进一步比拟不同分组Permanova辩论得到的F值，发现对肠说念中乳酸菌影响因素大小排序分别为性别 > 地区 > 肥美。
2.2 志愿者肠说念中双歧杆菌组成 2.2.1 志愿者肠说念中双歧杆菌的组因素析一齐样品共得回原始下机数据量62 046条，所有这个词志愿者测序数据共毁坏到11个双歧杆菌菌种，平均相对含量在1%以上的共有5个，分别为芳华双歧杆菌(B. adolescentis，39.88%)、长双歧杆菌(B. longum，27.15%)、链状双歧杆菌(B. catenulatum，26.30%)、两歧双歧杆菌(B. bifidum，3.92%)和角双歧杆菌(B. angulatum，1.71%)。含量较低的双歧杆菌包括动物双歧杆菌(B. animalis，0.15%)、短双歧杆菌(B. breve，0.03%)、B. kashiwanohense (0.01%)、B. boum (0.001%)、大双歧杆菌(B. magnum，0.001%)和家兔双歧杆菌(B. cuniculi，0.001%)。
基于图 5发现，所有这个词样品以加权UniFrac距离进行UPGMA (Unweighted pair-group method with arithmetic means)聚类时，样品不错分为两个主要的类群，两个类群的主要相反在于齿双歧杆菌(Bifidobacterium catenulatum)的相对含量存在权贵相反(P < 0.001)。
2.2.2 志愿者肠说念双歧杆菌群落结构的影响因素比拟分析为了进一步考据性别、BMI值和地域对志愿者肠说念双歧杆菌可能的影响，使用基于UniFrac距离的Permanova查考将这3个因素对菌群带来的相反进行分析，恶果如图 6所示。恶果深化，性别、BMI值和地域均未能权贵影响志愿者肠说念中双歧杆菌的结构(P > 0.05)。
2.3 志愿者肠说念中乳酸菌和双歧杆菌关系性分析为了揭示肠说念中乳酸菌之间、双歧杆菌之间以及乳酸菌和双歧杆菌之间的关系关系，对样品中的主要乳酸菌和双歧杆菌进行了Spearman关系性分析，不同菌种之间的关系关系见表 2。
由关系性恶果可知，乳酸菌相互之间关系性较为密切，且相互之间多为正关系关系。双歧杆菌具有关系关系的菌种惟一3对，其中2对为负关系关系。乳酸菌与双歧杆菌不同菌种间关系性不尽交流，与具体的菌种关联。
3 盘考乳酸菌和双歧杆菌是东说念主体肠说念中的进击益生菌，在繁多限制应用极为闲居。可是，所有这个词乳酸菌在健康成东说念主肠说念中的平均相对含量均相称低，累计仅占所有这个词肠说念菌群的0.01%-1.8%[14]。双歧杆菌是重生儿肠说念中最早定殖的上风菌属之一，而在成东说念主肠说念中，其相对含量长久处于较低的水平[15]。准确揭示这部分在东说念主类肠说念中含量较低，同期又对东说念主体健康极为进击的益生菌群的品貌和各种性组成，关于后续评估基于东说念主体的各项药物、益生菌/元等的烦嚣实验和个性化医疗的发展具有进击道理。关于具有民族饮食性情的蒙古族东说念主群，Zhang等[16]应用荧光定量PCR技艺和基于16S rRNA基因V1-V3可变区的高通量测序技艺，对蒙古国64名蒙古族志愿者肠说念菌群进行了为期一年的动态监测，在属的水平上揭示了蒙古族东说念主群的中枢菌群组成及变化情况。在本磋商中，咱们初度秉承乳酸菌和双歧杆菌的特异性引物扩增与PacBio SMRT三代测序相贯串的技艺，在种水平探讨了蒙古族东说念主群肠说念中乳酸菌和双歧杆菌的品貌和生物各种性。此外，有磋商发现地域、年岁、性别和个体BMI均会对东说念主体肠说念菌群组成产生影响[15， 17-18]，本磋商对比分析了地域、性别和个体BMI因素对志愿者体内乳杆菌和双歧杆菌可能的影响，由于志愿者年岁分散较窄未作念探究。
本磋商秉承乳酸菌特异性引物扩增的家具中约有20.83%的序列是属于目的片断，渊博于乳酸菌在东说念主体肠说念微生物中所占比例，样本中共检测到68个乳酸菌种，其中Streptococcus和Lactobacillus在志愿者样品中平均相对含量为38.59%和26.39%。Zhang等发现蒙古族肠说念中的中枢菌群附庸于Prevotella、Bacteroides、Faecalibacterium、Ruminococcus、Subdoligranulum和Coprococcus[19]，不包括Streptococcus和Lactobacillus，这与肠说念中乳酸菌的骨子含量较低是相符的。
恶果深化唾液链球菌占比最高(36.41%)，唾液链球菌是口腔早期定殖菌，其同期可定殖于肠说念中，具有下调小肠上皮细胞核因子κB (Nuclear factor κB，NF-κB)的作用，在肠说念炎症反应和内稳态中阐明进击功能[20]，可是也有磋商发现该菌在肝性脑病患者肠说念微生物中品貌较高，不错看成调治过程中的生物象征物[21]，上述磋商标明唾液链球菌在东说念主体肠说念中的作器具有两面性。
不同道愿者肠说念中乳酸菌和双歧杆菌的品貌和各种性指数不同，但基于统计学分析深化：不同性别、不同地域以及不同BMI值的志愿者之间乳酸菌和双歧杆菌的结构并莫得权贵相反(P > 0.05)。He等对我国广东地区7 009个受试者的肠说念菌群进行分析，发现菌群相反与受试者地点的地区关联最强，远超年岁、BMI值、性别等经营[21]。这一表象在本磋商恶果中并莫得深化，可能的原因是：(1)由于志愿者地点地区较分散，不像广州地区东说念主群比拟集合，且总样本量比拟少，特征相反未深化；(2)由于大部分蒙古国留学生志愿者已到我国内蒙古糊口，由地域引起的较大相反受饮食、环境等因素的影响而削弱。
相对而言，女性肠说念菌群中乳杆菌属和魏斯氏菌属平均相对含量高于男性，尤其是瘤胃乳酸杆菌和阴说念乳杆菌较丰富，而男性志愿者肠说念险些不存在阴说念乳杆菌，但其唾液链球菌含量是高于女性的。Suzuki等针对酸奶消费与健康后生肠说念菌群的关系性磋商发现，酸奶消费对志愿者肠说念中乳酸菌的影响也存在性别相反[22]。可是，性别是怎样影响肠说念微生物组成这一问题现在仍莫得定论，其中的一种可能是男女身段特征不同引起了菌群定殖相反，更详备的影响机制还需要后续磋商进一步探索。关于双歧杆菌的磋商恶果深化，长双歧杆菌的相对含量比拟高，此前的磋商发现长双歧杆菌部分亚种仍是进化出运载和耗尽多种不同结构寡糖的材干，使其在定殖方面比其他肠说念微生物更具上风[23]，这可能是该菌在肠说念双歧杆菌种所占比例较高的原因之一。Milani等的报说念深化链状双歧杆菌和芳华双歧杆菌是包括东说念主类在内的灵长类动物肠说念中典型的双歧杆菌菌种[24]，这与本磋商中芳华双歧杆菌、长双歧杆菌和链状双歧杆菌是志愿者肠说念总双歧杆菌中占比最多的恶果相吻合。凭证肠说念中上风菌群双歧杆菌菌种的不同，不错将志愿者分为2个不同类群，其中齿双歧杆菌(B. catenulatum)的相对含量存在权贵相反(P < 0.001)。Fang等[25]磋商发现齿双歧杆菌不错改善回肠粘膜损害和肠说念菌群生态失调，特出是在契机性致病菌Parasutterella菌属大批存在和可产生短链脂肪酸的厌氧菌、粪球菌属和梭菌属细菌数量减少的情况下，齿双歧杆菌可通过调整肠说念菌群而对肝脏起到保护作用。本磋商中志愿者肠说念菌群中的高齿双歧杆菌含量是否对肝脏有更好的保护作用还需进一步磋商。
本磋商还发现乳酸菌和双歧杆菌各有部分菌属或菌群存在权贵关系关系，如鼠李糖乳杆菌和长双歧杆菌权贵关系，Inturri等[26]也磋商发现鼠李糖乳杆菌HN001和长双歧杆菌BB536在体内抵消化液的耐受有协同增强的正关系作用。本磋商恶果在一定进度上响应了肠说念菌种之间复杂的多元化关系，也可能恰是这种菌群间的互相均衡、互相制约最终看守了东说念主体肠说念菌群的牢固性。
4 论断综上，本磋商为在种水平深入了解肠说念中乳酸菌和双歧杆菌各种性提供了新的磋商想路和实施决策，磋商恶果初度揭示了在种的水平上对健康蒙古族肠说念中乳酸菌和双歧杆菌各种性的意识。可是现在仍有部分恶果无法得到充分讲解【MADV-159】濡れ濡れびっちょまん 32010-07-23クリスタル映像&$MANIAC（クリス124分钟，尚需后续磋商逐渐揭示关系菌属或菌种的功能以及菌群间存在的各式作用机制。